數字放射自顯影系統主要用于對標記化合物的分布和動態變化進行追蹤。放射自顯影也是基因定位的一種重要手段,即所謂的原位雜交技術。RNA與為其編碼的DNA順序(基因)在分子水平上具有堿基配對的互補關系,因而可以互相結合,形成DNA-RNA分子雜交體。
如果把帶有放射性標記的RNA與細胞切片相互作用,RNA即可結合到染色體中與其互補的DNA片斷上,把這種切片經放射自顯影處理,即顯示出了該RNA基因存在的具體染色體部位,為遺傳學和基因工程提供有價值的資料。
數字放射自顯影系統正確操作步驟:
1、使用前先制備放射性同位素標記的化合物,通常是選用發射低能β射線的同位素,如14C、3H等。
2、使標記化合物被生物組織或細胞吸收,參加生物代謝。
3、把含有標記化合物的組織做成切片,置于載片上,再把切片表面上涂一薄層乳膠,在暗盒中放置一定時間,進行放射性“暴光”,然后按處理照像底片過程,經顯影、定影,顯示出被射線還原的銀粒子。
由于切片中放射性化合物在位置上與銀粒子沉淀吻合,因而銀粒子可指示出放射性化合物存在的部位。有時還可對切片再進行染色處理,以使標記部位顯示明確。
放射自顯影可制做用于光學顯微鏡觀察的標本,也可制做供電子顯微鏡觀察的標本,其分辨力約為0.1μm。放射自顯影標本處理過程,自涂乳膠步驟開始要在嚴密的暗室中進行,以免受自然光的干擾,增加本底,降低自顯影效果。